仪器名称:荧光光谱仪
厂家及型号:Edinburg FS5
购买日期:2023年
放置地点:逸夫南楼311室
管理员:吴小说
操作流程:
一、开机
1.先打开电脑。
2.打开仪器。操作前,确认使用什么样品支架,开机之前,先把支架安装好。
3.打开软件Fluoracle。
4.初始化后,软件跳出Signal rate对话框,就可以开始操作了。
二、光谱测试
1.在Signal rate界面调节样品信号。
2.在Source of light path中选择光源Xe lamp,Detector of light path中选择检测器Visible PMT-980,选完后,将Ex和Em的Bandwidth(也就是狭缝)调小,一般为0.1,点击Apply。
3.放置样品。
4.输入波长,调试狭缝,Emission信号不能超过1,000,000 cps(建议400,000- 500,000 cps)。
5.关闭signal rate,点击“λ”,选择测试方法。
三、量子产率测试
1.样品支架换成积分球。
2.测试之前,需要知道样品的激发波长,发射波长,和发射峰的终止波长。
3.在积分球中,安装相应的液体或者固体支架。
4.光源选择Xe lamp,检测器需要选择Visible PMT-980 + Integrating sphere,
调节Ex和Em狭缝,使得Emission信号值达到800000-1,000,000 cps之间,发射狭缝一般设置0.5 nm,激发狭缝3-10 nm,dwell time设置0.2-1 s,Step一般要求≤0.5 nm。
6.Emission scan,勾选Ex和Em校正文件,勾选Subtract background。开始波长为激发波长减去20 nm,终止波长为样品发射峰的终止波长。
7.测试空白曲线,液体用液体的空白溶剂,固体用积分球自带的空白样品。
8.扫描完成,放置样品,不更改任何的条件,扫描。
9.将空白曲线和样品曲线合并,点击Analysis中的Quantum Yield,进行量子产率计算。
四、寿命测试
1. Setup中选择μF lamp,选择微秒灯的频率。脉冲时间=1/频率,大于寿命的10~20倍。
2.光源选择microsecond Flashlamp,检测器选择Visible PMT-980。
3.调节Ex和Em狭缝,调节信号,Emission信号检测器噪声基础上,2000~3000 cps。
4.关闭signal rate,点击“τ”中的manual,主要设置的是time range和stop condition的peak counts。
5.设置完成后,点击new。
6.扫描完成后,点击analysis中的Exp. Tail fit,在1中输入估计的寿命值, 点击apply。相关系数X2在1.0~1. 3之间为宜。
7.拟合完成后,建议保存原始谱图和结果谱图。
8.填写仪器使用登记本。